酶消化法和組織貼塊法兩種基本脂肪間充質(zhì)培養(yǎng)基方法,但酶消化方法存在酶濃度和消化時(shí)間控制可能會(huì)損害細(xì)胞膜,減少細(xì)胞活動(dòng),甚至改變細(xì)胞功能,和繁瑣的操作,這不符合組織培養(yǎng)的基本原則,因?yàn)椴僮髟椒爆?污染的機(jī)會(huì)越多,細(xì)胞突變的可能性就越大。從簡(jiǎn)單方便的組織培養(yǎng)原則出發(fā),組織粘貼方法具有更多的優(yōu)點(diǎn):
①方法簡(jiǎn)單:直接切割臍帶,直接培養(yǎng)成糊狀,操作步驟少,實(shí)驗(yàn)室處理時(shí)間大大縮短,分離方法易于標(biāo)準(zhǔn)化
②經(jīng)濟(jì)實(shí)用:分離培養(yǎng)UCMSC分離成本低,不使用膠原酶
③安全性好:和所有干細(xì)胞一樣,如何預(yù)防?UCMSC污染和變異在分離培養(yǎng)過程中一直是人們關(guān)注的焦點(diǎn)。
如何將干細(xì)胞污染和變異的風(fēng)險(xiǎn)降至最低?盡量減少干細(xì)胞干預(yù)是減少干細(xì)胞污染和變異的根本途徑。例如,簡(jiǎn)化體外分離操作可以大大降低污染的可能性,例如減少各種污染“外來物質(zhì)”這也是《人體體細(xì)胞治療申請(qǐng)臨床試驗(yàn)指南》的基本要求——盡量避免異體血清、細(xì)胞因子、抗生素等?!巴鈦砦镔|(zhì)”當(dāng)然,酶消化中常用的各種酶也屬于“外來物質(zhì)”減少這些類別“外來物質(zhì)”不僅可以降低細(xì)胞變異的概率,而且可以有效地防止各種病原微生物的傳播。
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