友康生物
2023-04-11
公司熱點上期文章我們介紹了間充質干細胞（MSC）對輔助性T細胞Th1和Th17的抑制作用，Th1和Th17的過度活化與很多自身免疫性疾病和炎癥反應相關，因此下游用戶可以通過不斷開發(fā)MSC的這一生物學潛能，來攻克上述難治性疾病。
此外，我們也通過詳細的數據展示了友康開發(fā)的這款GMP級MSC無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)出的MSC對Th1的抑制率達到89.96%，對Th17的抑制率達到46.9%，是完全不輸同類進口產品的。
本期內容我們將繼續(xù)深挖MSC的免疫抑制與調節(jié)能力，用更多數據來展示友康GMP級MSC無血清培養(yǎng)基能更好地支持下游用戶開展研究。
一、MSC對Treg的促進率
1、實驗原理
調節(jié)性T細胞（Treg）是一類控制體內自身免疫反應性的T細胞亞群，它由胸腺產生后輸出至外周，并通過主動調節(jié)的方式抑制存在于正常機體內潛在的自身反應性T細胞的活化與增殖，從而調節(jié)機體的免疫力。
大量研究表明，MSC具有促進Treg增殖的作用。有研究報道MSC表面的TLR（Toll樣受體）活化后,Notch配體,DL1的表達升高了。CD4+T細胞的Notch信號通路通過細胞接觸的機制激活，結果Treg細胞比例升高。
此外，MSC還可以通過細胞間的接觸性抑制激活凋亡受體,并分泌前列腺素 E2等可溶性細胞因子引導Th17細胞向Treg細胞轉化。研究表明,MSC可以通過促進漿細胞樣DC分泌 IL-10 誘導分化Treg細胞。
2、下游應用
Treg細胞的數量減少或功能異常均有可能導致自身免疫病的發(fā)生，比如多發(fā)性硬化癥、活動性類風濕關節(jié)炎、I型糖尿病等。因此，可以通過深入開發(fā)MSC促進Treg細胞增殖的免疫抑制潛能來改善此類自身免疫疾病。
國內外已有報道，間充質干細胞來源外泌體能在體外誘導單核細胞株THP-1和外周血單核細胞向CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞分化，上調白細胞介素10與轉化生長因子β水平，從而促進Treg細胞的增殖和免疫抑制作用。
此外，還有研究表明，Poly (I:C)（一種TLR激動劑）預處理的ADSC（脂肪間充質干細胞）能明顯提高移植心臟的存活期，提高脾臟中Treg 細胞含量，減輕急性細胞性排斥反應，這也表明了MSC在器官移植中可以發(fā)揮重要作用。
3、友康GMP級培養(yǎng)基產出細胞實驗結果
通過友康的GMP級MSC無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)得到的MSC，經過嚴格的檢測，其對Treg細胞的促進率達到了24.58%。
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促進率=[(共培養(yǎng)陽-共培養(yǎng)陰)-(單陽-單陰)] / （共培養(yǎng)陽-共培養(yǎng)陰）=24.58%
二、誘導MSC表達IDO
1、實驗原理
吲哚胺2,3-雙加氧酶（IDO）是MSC細胞內一種含有血紅素的酶,可以催化代謝色氨酸產生犬尿氨酸。IDO對需要色氨酸增殖的T細胞產生耐受作用，還在功能靜止Treg細胞的激活和調節(jié)中起重要作用。
已有實驗證實，在MSCs存在時，添加外源性色氨酸可恢復同種抗原激活的T細胞增殖,加入IDO的競爭性抑制劑降低了MSCs 對同種抗原激活的CD4+T淋巴細胞的免疫抑制作用，IDO還參與抑制Th17的分化及FOXP3+Treg的產生。此外,MSCs表達IDO依賴IFN-Γ,實驗觀察到將 MSCs 置于炎癥環(huán)境時(如IFN-Γ)可抑制T細胞的增殖。
2、下游應用
IDO是一種胞內酶，廣泛表達于機體多種組織器官如肺臟、小腸，胎盤、脾臟、中樞神經系統(tǒng)等，降解必需氨基酸色氨酸，生成犬尿氨酸等代謝產物，在誘導母胎耐受、抗感染、腫瘤免疫、移植耐受等方面起著關鍵作用。
近年來研究發(fā)現細胞因子IFN-Γ、TNF-α可刺激人及小鼠骨髓來源MSC表達 IDO，Toll 樣受體3(TLR3)刺激下，MSC表達IDO，表現出免疫抑制作用。
研究發(fā)現了由于SLE（系統(tǒng)性紅斑狼瘡）患者 CD8+T 細胞數量增多，分泌大量 IFN-Γ，后者可促進異基因 MSC 表達大量IDO介導其對CD4+CD25-T 細胞增殖的抑制作用，另一方面，MSC可直接促進SLE 患者外周血CD4+CD25+ Treg 細胞增殖。因此，異基因 MSC 可通過直接或間接的方式上調 SLE 患者 Treg 細胞，誘導免疫耐受治療疾病。
3、友康GMP級培養(yǎng)基產出細胞實驗結果
友康的GMP級MSC無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)得到的MSC，從誘導MSC表達IDO的實驗中可以看出：在IFN-Γ和TNF-α的干預下，MSC可以正常表達IDO；作為陰性對照組的第1個條帶，MC未處理組不表達IDO；作為陽性對照組的β-actin條帶第4組（MSC未處理）和第5組（IFN-Γ處理）都可以正常顯示條帶。
實驗結果表明，友康的GMP級MSC無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)得到的MSC經誘導表達IDO的能力是正常的。
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我們通過上述兩個實驗進一步驗證了友康的這款GMP級MSC無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)出的間充質干細胞在未經干預的情況下，仍然有著優(yōu)秀的免疫抑制和調節(jié)能力。下游用戶在此基礎上優(yōu)化細胞的培養(yǎng)工藝及輸送載體，也必能使MSC的免疫調控功能達到更高的水平。
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