核糖核酸(縮寫為RNA,即RibonucleicAcid),存在于生物細(xì)胞以及部分病毒、類病毒中的遺傳信息載體。今天我們就來了解一下關(guān)于RNA提取的那些事兒。在一些臨床的病原微生物檢測、基因的定量表達(dá)研究、RNA測序以及轉(zhuǎn)錄組分析等研究中,往往需要獲得高純度、高質(zhì)量的RNA。這就涉及到RNA的提取和純化。RNA存在于各種生物體、組織和細(xì)胞中。常見的樣品來源多種多樣,比如:血液、植物組織、動物組織、細(xì)胞培養(yǎng)液、血漿或血清、腦脊液、尿液、咽拭子保存液、酵母、細(xì)菌等。不同的應(yīng)用需要提取的RNA種類也各不相同。
常見的RNA種類有:總RNA、mRNA、microRNA和小RNA、病毒RNA等。RNA的提取有多種方法。常見的方法有Trizol法、磁珠法和硅膜法。總體上都是利用高濃度的蛋白變性劑迅速破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)、抑制RNA酶活性,最大程度地保持RNA的結(jié)構(gòu)完整性,然后在合適條件下,利用各種載體吸附或者沉淀RNA,通過一定的洗滌液除去蛋白質(zhì)和鹽離子,經(jīng)洗脫液得到純化的RNA。