南京疫情的傳播鏈仍在繼續(xù)延伸,疫情“多點(diǎn)爆發(fā)”,全國(guó)各地又恢復(fù)緊張的防控狀態(tài),全面開展核酸檢測(cè)工作。在這緊張的環(huán)境下,如何避免“假陰性”乃是疫情防控的重中之重。所以,病毒采樣管的選擇是保障核酸檢測(cè)準(zhǔn)確性的利刃。
友康生物注意到,大部分廠家的病毒采樣管并沒有添加洗脫珠。眾所周知,樣本采集后的采樣管,需渦旋振蕩使樣本充分從拭子中釋放至采樣液。友康生物認(rèn)為,僅靠振蕩并不能有效提升樣本釋放率,所以堅(jiān)持在采樣液中添加特殊處理的洗脫珠,振蕩產(chǎn)生的渦旋驅(qū)動(dòng)洗脫珠撞擊采樣拭子,使黏附在拭子上的病毒顆粒完全釋放至采樣液。
那么采樣液中的洗脫珠是否能夠有效促進(jìn)樣本釋放,降低“假陰性”,友康生物用以下實(shí)驗(yàn)論證——
實(shí)驗(yàn)材料
病毒采樣管:去除洗脫珠的友康MT0501-7-3滅活型采樣管為實(shí)驗(yàn)組;包含洗脫珠的友康MT0501-7-3滅活型采樣管為對(duì)照組。每組設(shè)置兩個(gè)重復(fù)。
拭子:友康7cm折斷點(diǎn)植絨拭子。
檢測(cè)病毒:高濃度PEDV病毒;低濃度PEDV病毒。
核酸提取試劑盒:友康免裂解核酸提取試劑(磁珠法)。
其它材料:友康病毒分離無血清培養(yǎng)基用于稀釋病毒液;痰液混合液用于模擬黏性樣本。
實(shí)驗(yàn)步驟
1、病毒液的準(zhǔn)備。取病毒原液,采用友康病毒分離無血清培養(yǎng)基進(jìn)行倍比稀釋后得到高濃度病毒液;再對(duì)之稀釋10倍,得到低濃度的病毒液。兩種濃度的病毒液均準(zhǔn)備1mL。收集痰液1mL,與病毒液混合,混合后高濃度組病毒為3×104 copies/mL,低濃度組病毒為6×103 copies/mL。
2、采樣管的準(zhǔn)備。采樣管分為有洗脫珠和無洗脫珠2種,均配套用7cm折斷點(diǎn)拭子。
3、模擬采樣過程。取病毒與痰液的混合液100uL于1.5mL離心管中,用拭子將之完全吸取,然后將拭子折斷至采樣管中,旋緊管蓋。假設(shè)病毒在采樣液中充分釋放,則高濃度組病毒為1×103 copies/mL,低濃度組病毒為2×102 copies/mL。
4、核酸提取與檢測(cè)。提取核酸之前,先將各組管子在渦旋振蕩器上振蕩1分鐘。采用友康生物免裂解核酸提取試劑(磁珠法)進(jìn)行核酸的提取。提取完成后對(duì)各組進(jìn)行RT-qPCR檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
含洗脫珠組與去洗脫珠組擴(kuò)增曲線圖及各組Ct值統(tǒng)計(jì):
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
1、去除洗脫珠后,會(huì)導(dǎo)致相同提取條件下核酸的得率更低。
2、在臨界的病毒濃度下,采樣管中無洗脫珠可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果呈現(xiàn)假陰性。
目前,疫情防控形勢(shì)不容樂觀,多發(fā)、散發(fā)情況接連出現(xiàn),各地區(qū)都時(shí)時(shí)刻刻繃緊防控篩查這根弦。而實(shí)際病毒采樣的過程中,各種不確定因素不時(shí)發(fā)生,影響核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性,選用一款穩(wěn)定好用的病毒采樣管至關(guān)重要。
作為專注病毒樣本處理領(lǐng)域十五年的友康生物,我們專業(yè)且獨(dú)具“工匠精神”的病毒采樣產(chǎn)品,一定是您值得信賴的選擇!
友康生物與全國(guó)人民站在一起,攜手抗疫,共克時(shí)艱!我們終將成功!