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無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點(diǎn)

2021-03-07

行業(yè)熱點(diǎn)

無(wú)血清培養(yǎng)基的發(fā)展歷程分為無(wú)血清培養(yǎng)基(Serum-Free Medium,SFM)、無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基(Animal Component Free Medium,ACFM)、無(wú)蛋白培養(yǎng)基(Protein-Free Medium,PFM)及化學(xué)成分限定培養(yǎng)基(Chemically Defined Medium,CDM)等四類(lèi)。

無(wú)血清培養(yǎng)基

在使用無(wú)血清培養(yǎng)基時(shí),有些細(xì)胞需要逐漸適應(yīng),即先將原來(lái)的培養(yǎng)基與無(wú)血清培養(yǎng)基混合培養(yǎng),漸漸地再轉(zhuǎn)為完全的無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。有些貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,復(fù)蘇時(shí)也可用少量的血清先培養(yǎng),因?yàn)檠蹇芍?xì)胞貼壁,然后再換成無(wú)血清培養(yǎng)基。

組成成分:無(wú)血清培養(yǎng)基由營(yíng)養(yǎng)較完全的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和補(bǔ)充因子組成。

一、優(yōu)點(diǎn)

(1)避免血清不同批次間的質(zhì)量差異,提高細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性。
(2)避免血清對(duì)細(xì)胞的毒性作用和血清源性污染。
(3)避免血清組分對(duì)實(shí)驗(yàn)研究的影響。
(4)有利于體外培養(yǎng)細(xì)胞的分化。
(5)可提高目的蛋白的表達(dá)量并使產(chǎn)品易于分離純化。
(6)組分穩(wěn)定,可大量生產(chǎn)。
(7)不含有絲分裂原抑制劑,可以促進(jìn)細(xì)胞增殖。
二、缺點(diǎn)
(1)細(xì)胞易受某些機(jī)械和化學(xué)因素的影響,培養(yǎng)基應(yīng)用不如傳統(tǒng)的合成培養(yǎng)基方便。
(2)成本高。
(3)針對(duì)性很強(qiáng),一種無(wú)血清培養(yǎng)基僅適合某一類(lèi)細(xì)胞的培養(yǎng)。
(4)不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)及營(yíng)養(yǎng)成分的需求不同。

(5)雖然不添加動(dòng)物血清,但為了細(xì)胞的生長(zhǎng),培養(yǎng)基中依然包含大量動(dòng)植物來(lái)源蛋白,添加物質(zhì)的化學(xué)成分也不夠明確。

三、生產(chǎn)生物制品
目前,生產(chǎn)生物活性蛋白、疫苗、單克隆抗體和基因治療藥物的表達(dá)載體等生物制品時(shí)一般都采用可高密度生長(zhǎng)的動(dòng)物工程細(xì)胞。無(wú)血清培養(yǎng)技術(shù)的運(yùn)用,給動(dòng)物工程細(xì)胞提供了更優(yōu)的條件,進(jìn)而表達(dá)更多的目的產(chǎn)物,并有利于后續(xù)目的產(chǎn)物的分離和純化。
四、基礎(chǔ)研究領(lǐng)域
雖然基礎(chǔ)培養(yǎng)基加少量血清所配制的完全培養(yǎng)基可以滿足大部分細(xì)胞培養(yǎng)的要求,但對(duì)有些實(shí)驗(yàn)卻不適合。如,在利用DC腫瘤疫苗治療時(shí),所需要的樹(shù)突狀細(xì)胞和用于抗原致敏的腫瘤細(xì)胞,往往在胎牛血清(Fetal Calf Serum,F(xiàn)CS)中進(jìn)行培養(yǎng),這使得很難分辨哪些免疫應(yīng)答是由血清引起而非真正的先天免疫系統(tǒng)的作用,需要使用成分明確的無(wú)血清培養(yǎng)基排除動(dòng)物血清的干擾。

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