雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基

用途與描述

1、雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基可用于小鼠雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)。一般不需馴化，可直接轉(zhuǎn)入雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基中。
2、雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基也可用于大鼠及倉鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)，但一般需要馴化，方可適應(yīng)無血清的培養(yǎng)環(huán)境。
3、雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基中蛋白含量低，有利于表達(dá)抗體的純化。
4、雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基內(nèi)毒素低于0.25EU/mL，減少了腹水條件下困難的內(nèi)毒素去除操作。
5、三種適合不同生產(chǎn)用量的配套工藝（搖瓶、透氣袋、生物反應(yīng)器）

雜交瘤細(xì)胞是將免疫的小鼠脾淋巴細(xì)胞（B細(xì)胞）與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合在一起，該細(xì)胞既具備細(xì)胞能夠產(chǎn)生特異性抗體的特性，又具備腫瘤細(xì)胞能夠無限傳代（永生性）的特點(diǎn)。因此通過雜交瘤細(xì)胞的不斷傳代，就會(huì)得到所需種類的單克隆抗體。

主要成分

雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基主要成分：氨基酸，無機(jī)鹽，人白蛋白，轉(zhuǎn)鐵蛋白，胰島素，微量元素等。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

一、雜交瘤細(xì)胞不同培養(yǎng)方式細(xì)胞數(shù)量與抗體產(chǎn)量對(duì)照表（1號(hào)細(xì)胞株）

靜態(tài)培養(yǎng)條件：T25培養(yǎng)瓶，5mL培養(yǎng)基。細(xì)胞接種密度7.0x104/mL。連續(xù)7天不換液培養(yǎng)。
搖瓶培養(yǎng)條件：125mL搖瓶，30mL培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)速90rpm。細(xì)胞接種密度7.0x104/mL。連續(xù)7天不換液培養(yǎng)。

二、雜交瘤細(xì)胞不同培養(yǎng)方式細(xì)胞數(shù)量與抗體產(chǎn)量對(duì)照表（2號(hào)細(xì)胞株）

靜態(tài)培養(yǎng)條件：T25培養(yǎng)瓶，5mL培養(yǎng)基。細(xì)胞接種密度4.0x104/mL。連續(xù)7天不換液培養(yǎng)。
搖瓶培養(yǎng)條件：125mL搖瓶，30mL培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)速90rpm。細(xì)胞接種密度4.0x104/mL。連續(xù)7天不換液培養(yǎng)。

三、三種適合不同生產(chǎn)用量的配套工藝（搖瓶、透氣袋、生物反應(yīng)器）的培養(yǎng)數(shù)據(jù)

1、培養(yǎng)瓶靜態(tài)培養(yǎng)數(shù)據(jù)

1號(hào)細(xì)胞株

培養(yǎng)瓶靜態(tài)培養(yǎng)條件：T25培養(yǎng)瓶，5mL培養(yǎng)基。細(xì)胞接種密度3.5x105/mL。連續(xù)7天不換液培養(yǎng)。

培養(yǎng)瓶靜態(tài)細(xì)胞峰值：1.282x106/mL
培養(yǎng)瓶靜態(tài)抗體峰值：329.5mg/L（檢測方法：小鼠IgG  Elisa檢測）

2號(hào)細(xì)胞株

培養(yǎng)瓶靜態(tài)培養(yǎng)條件：T25培養(yǎng)瓶，5mL培養(yǎng)基。細(xì)胞接種密度2.6x105/mL。連續(xù)7天不換液培養(yǎng)。

培養(yǎng)瓶靜態(tài)細(xì)胞峰值：1.335x106/mL
培養(yǎng)瓶靜態(tài)抗體峰值：390mg/L（檢測方法：小鼠IgG  Elisa檢測）

2、搖瓶培養(yǎng)數(shù)據(jù)

1號(hào)細(xì)胞株

搖瓶培養(yǎng)條件：125mL搖瓶，30mL培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)速90rpm。細(xì)胞接種密度7x10⁴/mL。連續(xù)7天不換液培養(yǎng)。

搖瓶細(xì)胞峰值：2.185x10⁶/mL
搖瓶抗體峰值：510mg/L（檢測方法：小鼠IgG  Elisa檢測）

2號(hào)細(xì)胞株


搖瓶培養(yǎng)條件：125mL搖瓶，30mL培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)速90rpm。細(xì)胞接種密度4x10⁴/mL。連續(xù)7天不換液培養(yǎng)。

搖瓶細(xì)胞峰值：1.588x10⁶/mL
搖瓶抗體峰值：521mg/L（檢測方法：小鼠IgG  Elisa檢測）


3、2L培養(yǎng)袋培養(yǎng)數(shù)據(jù)（靜態(tài)培養(yǎng)）

1號(hào)細(xì)胞株

培養(yǎng)袋靜態(tài)培養(yǎng)條件：2L培養(yǎng)袋，1L培養(yǎng)基。接種密度3.4x105/mL。連續(xù)9天根據(jù)密度補(bǔ)液培養(yǎng)。

培養(yǎng)袋細(xì)胞峰值：2.542x106/mL
培養(yǎng)袋抗體峰值：480.3mg/L（檢測方法：小鼠IgG  Elisa檢測）

2號(hào)細(xì)胞株

培養(yǎng)袋靜態(tài)培養(yǎng)條件：2L培養(yǎng)袋，1L培養(yǎng)基。接種密度2.0x105/mL。連續(xù)9天根據(jù)密度補(bǔ)液培養(yǎng)。

培養(yǎng)袋細(xì)胞峰值：2.170x106/mL
培養(yǎng)袋抗體峰值：522.5mg/L（檢測方法：小鼠IgG  Elisa檢測）

四、與現(xiàn)有國外品牌的部分對(duì)照數(shù)據(jù)

細(xì)胞密度方面：Yocon培養(yǎng)基最高細(xì)胞密度為1.282x106/mL，*****培養(yǎng)基最高細(xì)胞密度為1.370x106/mL。最高細(xì)胞密度確實(shí)差異不大。
細(xì)胞倍增時(shí)間方面：Yocon培養(yǎng)基第2天即達(dá)到了細(xì)胞密度峰值，*****培養(yǎng)基第3天達(dá)到細(xì)胞密度峰值。細(xì)胞倍增時(shí)間差異顯著。

抗體表達(dá)方面：
1號(hào)細(xì)胞株。Yocon小鼠IgG抗體表達(dá)量峰值為329.5mg/L，相比*****的240.0mg/L。多出37%。差異明顯。     

【雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基   使用前特別提示】 

1. 雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基的使用方法與血清培養(yǎng)基及血清替代物培養(yǎng)基相比，確有差別。

敬請(qǐng)用戶仔細(xì)查看雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基產(chǎn)品使用說明書后操作，請(qǐng)勿僅以既往經(jīng)驗(yàn)使用本產(chǎn)品。
與血清培養(yǎng)基相比，本產(chǎn)品在培養(yǎng)某些雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需提前進(jìn)行馴化。

1) 對(duì)于采用血清及血清替代物培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，在初次使用Yocon 雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基時(shí)，為防止培養(yǎng)環(huán)境的劇烈變化對(duì)
細(xì)胞造成的損傷，需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行馴化操作。
首次更換為Yocon 雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基時(shí)，需要在其中添加原培養(yǎng)方法中等量的血清或者替代物。在此后的兩次細(xì)胞傳代中，
依次減半血清或者替代物的濃度。第三次傳代，直接離心取上清，更換為Yocon 雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基，完成馴化過程。
2) 對(duì)于采用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，可以直接更換為本產(chǎn)品進(jìn)行換液和傳代操作，無需經(jīng)歷馴化過程。

2. 使用培養(yǎng)基靜態(tài)培養(yǎng)和動(dòng)態(tài)培養(yǎng)的不同之處

靜態(tài)培養(yǎng)：如客戶靜態(tài)培養(yǎng)，可直接使用本培養(yǎng)基，無需做任何處理
動(dòng)態(tài)培養(yǎng)：如客戶動(dòng)態(tài)培養(yǎng)，需額外添加0.1%PLURONIC F-68，防止在攪拌培養(yǎng)中，剪切力對(duì)細(xì)胞的損傷。如未添加防剪切力
保護(hù)劑，細(xì)胞生長不佳，甚至死亡。