無菌控制專題（三）|細(xì)胞療法中輸入材料的風(fēng)險(xiǎn)控制

在供體選擇和細(xì)胞收集的過程中，存在多種風(fēng)險(xiǎn)，這些風(fēng)險(xiǎn)可能涉及供體的健康狀況、細(xì)胞質(zhì)量、操作過程等多個(gè)方面。供體可能患有未檢測(cè)出的傳染病或遺傳性疾病，這些疾病可能通過細(xì)胞傳遞給受者；細(xì)胞收集過程中可能存在操作不當(dāng)導(dǎo)致的污染、損傷等問題。

自體細(xì)胞（患者特異性）：根據(jù) 21 CFR 1271.90（a）（1），自體細(xì)胞不需要進(jìn)行供體資格確定或傳染性病原體的供體篩查。然而，由于供體中可能存在病原體，應(yīng)確定生物加工是否會(huì)因供體中存在的病原體進(jìn)一步傳播而增加對(duì)受體的風(fēng)險(xiǎn)，從而在給藥時(shí)可能導(dǎo)致感染。

同種異體細(xì)胞（通用）：對(duì)于同種異體細(xì)胞或組織，制造商必須按照 21 CFR 第 1271 部分的要求進(jìn)行供體篩查和測(cè)試。所有類型細(xì)胞和組織的供體都必須針對(duì)相關(guān)傳染性病原體和疾病的風(fēng)險(xiǎn)因素和臨床證據(jù)進(jìn)行篩查。如果使用臍帶血或其他母源性組織，必須對(duì)產(chǎn)婦進(jìn)行篩查和測(cè)試。

自體和同種異體細(xì)胞培養(yǎng)物僅針對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素、無菌性和支原體進(jìn)行測(cè)試。此外，同種異體細(xì)胞培養(yǎng)物和一些自體細(xì)胞培養(yǎng)物還需要針對(duì)血源性傳染性病原體進(jìn)行篩查。

不同來源的干細(xì)胞的相對(duì)微生物污染率可能為骨髓 > 脂肪組織 > 臍帶血 > 外周血。這種風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)與細(xì)胞收集方法的侵入性、環(huán)境控制和所需操作的數(shù)量有關(guān)。

對(duì)于骨髓或脂肪組織的采集，需要在手術(shù)室進(jìn)行；對(duì)于臍帶血的采集，需要做好產(chǎn)婦風(fēng)險(xiǎn)篩查；對(duì)于外周血的采集，需要進(jìn)行皮膚消毒，在收集過程中轉(zhuǎn)移前10毫升。

就微生物污染和人員安全而言，細(xì)胞收集、處理和遞送的封閉系統(tǒng)優(yōu)于開放系統(tǒng)。例如，使用封閉系統(tǒng)進(jìn)行血液收集、細(xì)胞分離和洗滌以及靜脈袋制備時(shí)，白細(xì)胞分離過程中微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)降低。

二、細(xì)胞培養(yǎng)試劑的風(fēng)險(xiǎn)與控制

動(dòng)物源性或人源性細(xì)胞培養(yǎng)基成分，如胎牛血清或人AB血清，具有潛在的更高微生物污染風(fēng)險(xiǎn)。

這主要是由于動(dòng)物源性或人源性細(xì)胞培養(yǎng)基的原料來源更加復(fù)雜，血清的組分非常復(fù)雜，富含各種營養(yǎng)物質(zhì)，更容易被微生物污染。另外，在血清采集、加工、儲(chǔ)存和運(yùn)輸過程中，如果操作不當(dāng)或環(huán)境條件不達(dá)標(biāo)，都可能導(dǎo)致微生物的污染。

因此，目前細(xì)胞療法實(shí)際應(yīng)用和藥物申報(bào)過程中，存在使用化學(xué)成分完全明確的無血清培養(yǎng)基的強(qiáng)烈趨勢(shì)，避免不明組分帶來微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)。

化學(xué)成分明確的培養(yǎng)基由于其原料使用更苛刻，生產(chǎn)條件更嚴(yán)格，避免了因動(dòng)物血清造成的病毒、支原體等污染風(fēng)險(xiǎn)，又具有較高特異性能夠支持特定細(xì)胞更好成長，而且組分穩(wěn)定，可大量生產(chǎn)，更方便下游產(chǎn)物分離和純化，因此目前在科研及商業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用愈加廣泛。

由于細(xì)胞不能滅菌，因此細(xì)胞療法生產(chǎn)工藝中使用的所有原材料和耗材都必須經(jīng)過滅菌處理，不含細(xì)菌內(nèi)毒素、病毒和支原體等污染物。耗材應(yīng)無菌、無熱原，最好是一次性使用，因?yàn)榧?xì)胞療法生產(chǎn)工藝中沒有滅菌步驟。耗材一般都是通過伽馬射線照射、環(huán)氧乙烷或其他合適的方法滅菌后購買的。滅菌工藝必須經(jīng)過充分驗(yàn)證，因?yàn)檫@些組件可能會(huì)直接接觸細(xì)胞。

使用前應(yīng)對(duì)耗材進(jìn)行目視合格性檢查（例如，應(yīng)觀察到無泄漏）；無菌性、內(nèi)毒素和完整性在經(jīng)認(rèn)證的供應(yīng)商證書上進(jìn)行確認(rèn)。如果材料不透消毒劑，可在使用前對(duì)耗材一次性包裝的外部進(jìn)行消毒，以進(jìn)一步降低微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)。

耗材的另一個(gè)關(guān)鍵方面是，它們通常是為最終用戶定制的，因此必須考慮業(yè)務(wù)因素，以確保持續(xù)供應(yīng)。應(yīng)注意耗材是否能滿足生產(chǎn)工藝的需要。耗材應(yīng)便于通過管焊接或其他先進(jìn)的無菌連接方式進(jìn)行先進(jìn)的無菌操作，并將引入微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)降至最低。

在細(xì)胞療法中，對(duì)輸入材料的風(fēng)險(xiǎn)控制是確保治療效果和患者安全的重要環(huán)節(jié)。通過嚴(yán)格進(jìn)行供體檢查和細(xì)胞收集、選擇高質(zhì)量培養(yǎng)基和耗材、優(yōu)化制備和儲(chǔ)存過程以及規(guī)范操作等措施，可以有效降低輸入材料的風(fēng)險(xiǎn)，提高細(xì)胞療法的安全性和有效性。同時(shí)，建立完善的質(zhì)量管理體系和風(fēng)險(xiǎn)控制機(jī)制也是保障細(xì)胞療法成功實(shí)施的重要保障。