第四期|適配好、易染色，友康MSC三系誘導(dǎo)分化試劑盒，優(yōu)化MSC鑒定體驗(yàn)——三系分化原理與產(chǎn)品性能

MSC向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)的分化過(guò)程可以大致分為骨形成和骨重塑兩個(gè)階段。在骨形成階段，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞會(huì)定向分化為骨原細(xì)胞，進(jìn)一步分化為成骨前體細(xì)胞，進(jìn)入快速增殖期。

隨著成骨細(xì)胞的進(jìn)一步分化，成熟的成骨細(xì)胞表達(dá)ECM（細(xì)胞外基質(zhì)）鈣化相關(guān)蛋白，如骨鈣蛋白和骨橋蛋白，長(zhǎng)時(shí)間的成骨誘導(dǎo)使鈣離子以鈣鹽方式沉淀下來(lái)，形成“骨結(jié)節(jié)”。骨結(jié)節(jié)可通過(guò)茜素紅染色，把外面沉積的鈣結(jié)節(jié)染成深紅色。

使用友康生物GMP級(jí)間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基（貨號(hào)NC0106+NC0106.S）培養(yǎng)的P5代MSC進(jìn)行成骨分化，14天可見(jiàn)鈣結(jié)節(jié)生成，21天鈣結(jié)節(jié)覆蓋率90%以上。

二、成軟骨誘導(dǎo)分化

MSC向成軟骨分化通過(guò)MSC聚集成團(tuán)，團(tuán)中間的細(xì)胞經(jīng)分裂分化轉(zhuǎn)變成一種大而圓的細(xì)胞，即成軟骨細(xì)胞；接著成軟骨細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓能浌羌?xì)胞。

通常用阿利新藍(lán)鑒定成軟骨細(xì)胞分化結(jié)果。阿利新藍(lán)屬于堿性染料，可與細(xì)胞內(nèi)的核酸結(jié)合，使細(xì)胞核呈深藍(lán)色；還可與軟骨基質(zhì)中的多糖結(jié)合，使軟骨細(xì)胞和基質(zhì)呈淺藍(lán)色。

使用友康生物GMP級(jí)間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基（貨號(hào)NC0106+NC0106.S）培養(yǎng)的P5代MSC進(jìn)行成軟骨分化，誘導(dǎo)分化20天左右阿利新藍(lán)染色即可看見(jiàn)明顯藍(lán)色著色。

MSC向成脂誘導(dǎo)的分化分為兩個(gè)階段，先是MSC分化為脂肪前體細(xì)胞，最后分化為脂肪細(xì)胞，出現(xiàn)脂肪細(xì)胞中顯著的標(biāo)志物——脂肪滴。脂肪滴經(jīng)油紅O染色后在顯微鏡下呈現(xiàn)顯著的紅色，未分化細(xì)胞則無(wú)明顯顏色。

使用友康生物GMP級(jí)間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基（貨號(hào)NC0106+NC0106.S）培養(yǎng)的P5代MSC進(jìn)行成脂分化，8天時(shí)即可初步觀察到脂滴形成，12天時(shí)染色已有大量脂滴形成。